天津六色免疫组化技术服务 来电咨询 上海朝瑞生物科技供应

    福尔马林)应用**广–原理：形成分子间的交联，影响蛋白构型而使之固定。–优点：形态结构保存好，且穿透性强，组织收缩少。–缺点：·甲醛放置过久可氧化为甲酸，使溶液pH降低，影响染色；·醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍；·分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，天津六色免疫组化技术服务。可造成假阴性的染色结果。–注意事项：·缩短固定时间，降低固定温度(4C)，为此组织块不宜过厚。·改用中性缓冲福尔马林，以pH值～，减少固定液pH的变化。·固定后充分水洗以减少分子间交联。·切片在作免疫组化染色前，先经预处理使抗原再现(抗原修复)。·戊二醛：–穿透性强，微细结构保存好，但对抗原有一定影响，常与其他固定剂联合用作免疫电镜固定液。·多聚甲醛(常用4%)：–可用于免疫电镜；也可用于免疫荧光染色。·主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别是细胞表面抗原，例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)，天津六色免疫组化技术服务、主要组织相容性抗原等。(2)醇类·**常用的醇类固定剂是乙醇。–其固定作用：使细胞内蛋白、糖类发生沉淀。–优点：穿透性强、抗原性保存好，天津六色免疫组化技术服务。–缺点：·脱水性强，易引起组织收缩、变硬，影响切片质量。

免疫组化，是应用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使结合抗体的显色剂进行显色来确定组织或细胞内抗原，对其进行定位、定性及相对定量的研究。是生命科学研究中常用且重要的实验方法。

但是要想得到好的实验结果，并不是那么容易。

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    –缺点：对封闭牢固的抗原决定簇暴露不理想。(3)微波照射法·将玻片放入装有抗原修复液的容器中，置微波炉加热至95℃以上，持续l0～15分钟，冷却后，按免疫组化染色步骤进行。·此方法由于微波场内极性分子、离子高速运动，撞击交联的网链，使抗原异常的构想恢复正常，且因分子运动产热、效率高、时间短，对抗原再现效果好。(4)高压加热法暴露抗原·将玻片浸入抗原修复液内，置高压锅中高压2～3min，可取得极好的效果。·由于高压下受热均匀，特别使用于大批量标本的染色。(1)酸水解法·酸水解可使交联断裂、暴露抗原。·将玻片浸入1mol/LHCl溶液中，室温作用20min(温度升高，作用时间缩短)。·此法能增强特异性染色，降低背景，但需注意水解过度将破坏抗原性及形态结构。加热法的注意事项·达到规定的温度(92～95C以上)；·维持一定的时间；·避免切片干涸(抗原可能完全丢失)；·加热后必须经过室温自然冷却20～30分钟，使未折叠的蛋白分子链恢复天然构型；·修复液：–**常用的是；–***研究表明碱性修复液更有效，推荐使用1mM的EDTA缓冲液()。4、载玻片的处理·抗原修复过程中，由于高温、高压等诸多固素的影响，极易造成脱片。为防预防脱发片，常用粘附剂处理载玻片。

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